蔬菜、水果中農(nóng)藥多殘留快速分析方法
在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中, 為了提高病蟲害防治效果和抑制病蟲害的抗藥性, 常常交替使用不同種類的農(nóng)藥, 或使用多類農(nóng)藥混配的復(fù)合農(nóng)藥, 從而引起農(nóng)產(chǎn)品中的多農(nóng)藥殘留。這些殘留農(nóng)藥對(duì)農(nóng)產(chǎn)品造成嚴(yán)重污染, 也給人體健康帶來極大危害。因此, 對(duì)農(nóng)產(chǎn)品特別是新鮮蔬菜、水果實(shí)施農(nóng)藥殘留檢測(cè), 已成為社會(huì)各界的共同要求。傳統(tǒng)的單一農(nóng)藥殘留測(cè)試方法已不能適應(yīng)新的檢測(cè)要求, 果蔬樣品的測(cè)定隨著質(zhì)譜技術(shù)的發(fā)展, 質(zhì)譜法已逐漸成為農(nóng)藥殘留分析的有效手段。本文采用固相萃取- 毛細(xì)管氣相色譜- 質(zhì)譜連用法對(duì)果蔬中有機(jī)氯及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)及樣品處理方法進(jìn)行了研究。
1 實(shí)驗(yàn)部分
1.1 儀器
Agilent6890GC/5973N GC- MS 連用儀、HP- 5MS 毛細(xì)管色譜柱及質(zhì)譜工作站（美國Agilent 儀器有限公司）；氮吹儀（Pierce 公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（RE252A, 上海亞榮生化儀器廠）；超聲清洗器（SBS5200, 必能信超聲上海有限公司）；Florisil 固相萃取柱（6ml,1000mg,Agilent公司） 。
1.2 試劑與材料
已腈、丙酮、石油醚（60～90攝氏度）、正己烷（均為分析純, 均用全玻璃蒸餾裝置重蒸餾）；無水硫酸鈉（650攝氏度 灼燒5h）；氯化鈉（120攝氏度 烘4h）。
六六六的4 種異構(gòu)體（a- BHC、B- BHC、r- BHC、-BHC）、滴滴涕體（PP-DDE、PP-DDD、op-DDT、PP-DDT）、艾試劑（aldrin） 、狄試劑（dieldrin）、氰戊菊酯（Fenvalerate） 、氯氰菊酯（Cypermethrin）、百菌清（Chlorothalonil） 、溴氰菊酯（Deltamethrin）、三氯殺螨醇（Dicofol）、七氯（Heptachlor）、甲氰菊酯（Fenpropathrin）、氯菊酯（Permethrin） （由中國標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心提供） , 質(zhì)量濃度均為0.10g/l, 純度均為百分之99。農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品用正己烷稀釋成適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液, 于室溫下密閉保存。
[ 發(fā)表時(shí)間：2006-8-2 ]
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1.3 實(shí)驗(yàn)條件
色譜柱HP-5 毛細(xì)管柱（30m×0.25mm×0.25μm）, 載氣: 為氦氣, 流速1.0ml/min, 進(jìn)樣方式為不分流進(jìn)樣, 進(jìn)樣量1μl；進(jìn)樣口溫度240攝氏度,升溫程序:初溫80攝氏度以10攝氏度/min升至160攝氏度保持5min；再以15攝氏度/min 升溫至260攝氏度保持15min。
質(zhì)譜條件EI 離子源；電子能量70eV；發(fā)射電流0.2mA；光電倍增器電壓350V；離子源溫度200攝氏度；接口溫度250攝氏度；掃描質(zhì)量范圍50～450amu; 掃描速度1sec/scan; 溶劑延遲4min。以各農(nóng)藥的保留時(shí)間和特征的質(zhì)量離子進(jìn)行定性。以峰面積為定量指標(biāo), 采用外標(biāo)法計(jì)算樣品中農(nóng)藥殘留量。
1.4 試驗(yàn)步驟
將樣品放入食品粉碎機(jī)中充分粉碎,稱取20g 置于100ml 具塞錐形瓶中, 加入50ml 已腈, 超聲提取30min。再加入5g 氯化鈉, 振蕩, 靜止分層, 轉(zhuǎn)移上層有機(jī)相, 并使其通過無水硫酸鈉玻璃小柱, 并用石油醚少量多次洗滌脫水小柱, 合并洗出液, 于40攝氏度水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干, 加入正己烷溶解后再加入到已用5ml 正己烷活化的Florisil 固相萃取柱凈化, 用洗脫液9（百分之20丙酮正己烷溶液）洗脫, 收集洗脫液15ml 于離心試管中, 在45攝氏度氮吹儀上用氮?dú)鈱⑵錆饪s并用正己烷定容至2ml 上機(jī)測(cè)定。
2 結(jié)果與討論
2.1 固相萃取操作條件的選擇
Florisil 固相萃取小柱是正相固相萃取, Florisil 填料對(duì)樣品中的色素等極性雜質(zhì)有很強(qiáng)的吸附能力, 而對(duì)非極性和弱極性的待測(cè)組分不易吸附, 且待測(cè)組分的極性與固定相極性差別越大, 凈化效果越好。同時(shí)還試驗(yàn)了多種洗脫劑的洗脫效果, 結(jié)果發(fā)現(xiàn), 以百分之20丙酮正己烷溶液為洗脫劑既能保證有高的回收率, 又能保證一些更強(qiáng)保留的雜質(zhì)組分不被洗出。
[ 發(fā)表時(shí)間：2006-8-2 ]
2.2 定性及定量離子的選擇
由于GC-MS是利用化合物的保留時(shí)間、特征離子及其之比進(jìn)行定性、定量分析, 所以和只要目標(biāo)化合物的特征離子不一樣, 即使沒有被很好地分離也能進(jìn)行準(zhǔn)確的定性及定量。本實(shí)驗(yàn)采用選擇離子模式采集數(shù)據(jù), 根據(jù)每個(gè)農(nóng)藥全掃描得到的質(zhì)譜圖, 選擇2～3個(gè)適合的離子作為其特征離子（見下表 略）, 其中一個(gè)離子用于定量。定量離子的選擇應(yīng)考慮以下幾點(diǎn): ①選擇特征性高的離子; ②選擇質(zhì)量數(shù)高的離子; ③選擇對(duì)稱性高且重現(xiàn)性好的離子; ④選擇與柱流失碎片離子不同的離子（如不宜選擇73、147、149、207、221、281、327、355 等作為定量和定性離子） 。
2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線、線性范圍與*小檢測(cè)量
配制18種標(biāo)準(zhǔn)使用液, 濃度在1～1000μg/l,即相當(dāng)于檢測(cè)樣品中0.001～1.0mg/kg, 以峰面積對(duì)濃度作線性回歸分析, 計(jì)算線性范圍及相關(guān)系數(shù)。檢出限是衡量?jī)x器或方法靈敏度的指標(biāo), *低檢出限是在色譜圖上可清楚確認(rèn)的分析目的物色譜峰的下限。通常為噪音的3 倍（SIG/N 等于 3）。下表即為18種農(nóng)藥的保留時(shí)間、定性及定量離子、*低檢出限及線性方程和相關(guān)系數(shù)。
2.4 回收試驗(yàn)
在樣品基質(zhì)中,添加已知目標(biāo)物進(jìn)行回收試驗(yàn), 是驗(yàn)證分析方法可靠性的重要手段。本研究采用在黃瓜的勻漿中,定量添加濃度1.0×10- 8～1.0×10- 6mg/l有機(jī)氯農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液, 按照黃瓜的農(nóng)藥殘留測(cè)定過程, 制備加標(biāo)樣品的提取液, 進(jìn)行GC-MS分析。經(jīng)9次平行測(cè)定, 計(jì)算回收率, 結(jié)果見表。從表中可以看出, 黃瓜中加標(biāo)的回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差、平均回收率在百分之80～110之間, 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差<百分之10,符合農(nóng)殘分析要求。
3 結(jié)論
氣-質(zhì)聯(lián)用快速檢測(cè)蔬菜水果中農(nóng)藥多殘留的分析方法已用于多種蔬菜和水果樣品的測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明: 此方法檢出限、回收率、精密度均能滿足農(nóng)殘分析要求, 且具有時(shí)間短、檢測(cè)準(zhǔn)確的特點(diǎn), 非常適用于大量樣品的常規(guī)實(shí)驗(yàn)室日常分析。